[摘要] 目的 探讨孕前优生健康检查中新婚待育夫妇地中海贫血筛查在出生缺陷干预应用中的意义，为预防和减少地贫病患儿的出生提供依据。 方法 双方均为潮汕平原地区户籍的孕前优生健康检查对象12 092例，所有样品均采用MCV法进行初筛，以静脉血平均红细胞体积（MCV≤80fL）作为诊断地贫的阳性参考指标。再应用Gap-PCR和反向点杂交技术（RDB-PCR）对部分样品进行α地贫基因和β地贫基因定型。 结果 在1679例（MCV≤80fL）血标本中检出7种α-地贫等位基因（染色体）942例，检出9种β-地贫等位基因（染色体）482例，计算上10 413例MCV阴性α-地贫基因推算数205例和10 413例MCV阴性-β地贫基因推算数46例，则潮汕平原地区人群α-基因携带率为9.49%（1147/12 092），β-基因携带率为4.37%（528/12 092）。 结论 新婚夫妇地中海贫血系统筛查及基因诊断能及时发现各类地贫异常患者，对预防出生缺陷有着重要意义。
[关键词] 地中海贫血；筛查；出生缺陷；计划生育
[中图分类号] R715.2 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2014）12-07-05
地中海贫血（简称地贫）是由于α和（或）β珠蛋白基因发生了改变，使得血红蛋白中一种或几种珠蛋白肽链合成速率降低或缺如，导致珠蛋白链生成失衡为特征的遗传性溶血性血红蛋白病[1-2]。
常见有α地贫和β地贫两种类型。广东省是该病的高发区。为了解本地区户籍人口地中海贫血的基因类型和频率分布，为开展遗传咨询、产前诊断预防和减少地贫病患儿的出生提供依据。我们对12 092例双方均为潮汕平原地区户籍的孕前优生健康检查对象进行地贫检查。
1 对象与方法
1.1 研究对象
广东省潮汕平原地区从2013年1月～2014年3月的新婚夫妇，共12092例（年龄20～34岁，夫妇双方均为最佳生育年龄），调查对象均为潮汕平原地区户籍人口。
1.2 研究方法
1.2.1 MCV值测定 以平均红细胞体积（MCV）为血液学表型初筛指标（采用日本Sysmex公司K4500型全自动血细胞分析仪进行检测）。取成人男女MCV≤80fL为截断值定为地贫筛查阳性。
1.2.2 地贫基因检测 筛查人群中夫妇双方或一方MCV≤80fL者，3种缺失型α-地贫（左侧缺失-α4.2缺失，右侧缺失-α3.7缺失，东南亚型缺失-SEA） 采用Gap-PCR技术技术检测；17种中国人较常见的β-地贫基因突变位点（41-42、IVS-Ⅱ-654、-28、71-72、17、βE、31、43、-32、27/28、-29、30、14-15、CAP、Int、IVS-I-1、IVS-I-5）采用RDB-PCR技术检测。
2 结果
2.1 MCV筛查结果
12 092例中，筛查出阳性者（MCV≤80fL）1679例，MCV>80fL者10 413例，阳性率13.89%（1679/12092）。
2.2 MCV筛查阴性地贫基因检测例数及推算例数
458例MCV筛查阴性地贫基因检测中，有8例静止型α-地贫、1例轻型β-地贫和1例静止型α复合轻型β。根据458例MCV筛查阴性地贫基因检测数据，推算出全部10 413例MCV筛查阴性地贫基因例数228。见表1。
2.3 地贫基因检测结果及地贫推算结果
1679例阳性（MCV≤80fL）者中，有1326例为地贫携带者，检出率为78.96%（1326/1679）。1679例阳性者地贫基因检测例数1326加上10 413例MCV筛查阴性地贫基因推算例数228，得出全部12 092例地贫推算例数1544。见表2。
2.4 α2.4地贫的发生率
在1679例（MCV≤80fL）血标本中检出7种α- 地贫基因型共922例，α-地贫等位基因（染色体）942个。计算上10 413例MCV阴性α-地贫基因推算数205例，则7种α- 地贫基因型共1127例，α-地贫等位基因（染色体）1147个，则潮汕平原地区人群α-基因携带率为9.49%（1147/12 092），α-基因频率为4.74%。
2.5 β-地贫基因
3 讨论
监测数据显示，从2000～2010 年，我国出生缺陷发生率从1.10%上升到1.50%[3-5]。持续升高的出生缺陷发生率已经严重影响着我国出生人口素质的提高，它不只是一个单纯的公共卫生问题，而且已成为影响社会经济发展和人们正常生活的社会问题[6-7]。之前课题组部分成员在揭阳部分地区共监测了10 773名0～1岁婴儿，发现出生缺陷238例，出生缺陷发生率为220.92/万，略高于全国平均水平，其中胎儿水肿综合征14例，13.00/万[8]。本项目我们对12 092例双方均为潮汕平原地区户籍的孕前优生健康检查对象进行地贫检查。
3.1 MCV>80fL筛查阴性者中漏检部分地贫情况分析
由于基因检测成本较高，不能成为大人群普查的首选方法。由于血细胞自动分析仪具备自动程度高、试剂成本低、影响结果的人为因素少和结果稳定可靠等优点。目前国内外已较普遍应用血细胞自动分析仪测MCV值来初筛地贫携带者[9-12]。缺点是MCV>80fL者存在漏检部分轻型地贫的情况。
为了评估MCV>80fL筛查阴性者的发病情况，我们对458例MCV筛查阴性者进行地贫基因检测。通过研究发现MCV筛查法不但漏诊了部分静止型α地贫和轻型β地贫，还漏诊了部分静止型α复合轻型β地贫患者。
我们通过对458例MCV筛查阴性者地贫基因检测情况的分析，来估算全部10 413例MCV筛查阴性地贫发病的例数，从而推算出全部12 092例新婚夫妇的α和β地贫基因携带率、基因频率及基因型构成比，使得最终的数据更接近实际真实数据。
3.2 潮汕平原地区育龄人群中α和β地贫分子流行病学的分析
我们在1679例（MCV≤80fL）阳性者中检出7种α-地贫等位基因（染色体）942例，检出9种β-地贫等位基因（染色体）482例，计算上10 413例MCV阴性α-地贫基因推算数205例和10 413例MCV阴性β-地贫基因推算数46例，则南海地区人群α-基因携带率为9.49%（1147/12 092），β-基因携带率为4.37%（528/12 092）。Xu等[13]报道广东地区α-地中海贫血携带率8.53%，β-地中海贫血携带率2.54%；比我们的数据低，原因可能为本研究的数据计入MCV筛查阴性的地贫发病推算数据以及人群的地区性遗传差异。
在1679例（MCV≤80fL）阳性者α-地中海贫血基因检测中，基因型-SEA/αα、-α3.7/αα和-α4.2/αα三种类型的比例最高，分别占78.42%，12.91%和6.51%；在β-地中海贫血基因检测中，基因型-CD41-42 、IVS-II-654和-28三种类型的比例最高，分别占40.07% 、22.82%和12.86%。另外482例β-地中海贫血携带者中有8.30%（40/482）为复合α-地贫双重杂合子。与我们的数据相近，韩俊英等[14]报道500例β-地贫基因携带者中8.6%为复合α-地贫双重杂合子。
3.3 新婚夫妇地中海贫血系统筛查及基因诊断，对预防出生缺陷有着重要意义
由于地中海贫血目前尚无有效治疗方法，杜绝重症患儿的出生是降低该病发病率的根本所在。地中海贫血具有显著的地域差异和高度的异质性[15]。广东省作为地中海贫血高发区，对育龄人群进行产前系统筛查及基因诊断以监控本地区地中海贫血的基因类型、基因携带率、基因频率对预防地贫患儿的出生有重要意义。
轻型地贫携带者人群由于本身无明显症状，易于在不知情的状况下生出地贫患儿；当夫妇双方为同型地贫基因携带者时，每次妊娠有1/4的风险出生纯合子的重型地贫患儿，因而及时、准确地迸行相应地贫因型的产前筛查及产前诊断，及早发现各类型的地贫基因携带者对预防地贫出生缺陷有着重要意义。
由于α和β地贫双重杂合子时多表现为HbA2 和（或） AbF 水平升高等β地贫特征，而α地贫的特征被掩盖，临床常诊断为β-地贫。α和β地贫双重杂合子若与α-地贫或β-地贫杂合子婚配，则有1/4几率生育重症地贫儿。因此，应重视α-和β-地贫双重杂合子，对诊断β-地贫携带者要注意有无复合α-地贫基因，以避免重症地贫儿出生。
总之，潮汕平原地区人口基数大，尤其是农村人口比例高，人们的卫生知识还是相对薄弱的，为提高人口素质，做好出生缺陷的孕、产前筛查与预防工作迫在眉睫，对最佳生育年龄新婚育龄对象进行免费孕前优生健康检查尤其显得重要。
（本项目得到广东省计划生育科学技术研究所郑立新副所长的指导，在此一并感谢。）
[参考文献]
[1] 茅矛，杜传书，王箐，等.地中海贫血的红细胞抗氧化酶和核苷酸代谢酶活性变化[J].中国病理生理杂志，1994，10（6）：477-481.
[2] 吕福通，谢丹尼.地中海贫血的相关研究进展[J].中国计划生育学杂志，2013，21（7）：490-494.
[3] 卫生部妇幼保健与社区卫生司.全国妇幼卫生监测及年报通讯[EB/OL].（2011-03-01）[2011-08-24].http：//.cn/qkpdf/yykx/yykx201412/yykx20141201-1.pdf" style="color:red" target="_blank">原版全文