摘 要 目的：先前有研究表明慢性牙周炎患者龈沟液中抑瘤素M（OSM）的水平升高。目前没有牙龈炎患者的龈沟液中OSM水平的相关研究。本实验检测了牙龈炎和慢性牙周炎患者龈沟液中OSM水平，以及慢性牙周炎患者牙周治疗后龈沟液中OSM的水平变化。方法：根据牙龈指数(GI)，探诊深度(PD)，附着丧失(CAL)，把60个个体分成3组，健康组(group Ⅰ)，牙龈炎组(group Ⅱ)，慢性牙周炎组(group Ⅲ)，第4组(group Ⅳ)为来源于慢性牙周炎组的20个个体进行为期8周的牙周治疗。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测龈沟液标本中的OSM水平。结果：慢性牙周炎组龈沟液中OSM的水平最高0.81±0.33pg/μl，健康组0.0689±0.022pg/μl，治疗后的慢性牙周炎组0.0943±0.037pg/μl，牙龈炎组0.125±0.023pg/μl。结论：龈沟液中OSM水平升高与PD和CAL正相关，可能成为反映牙周组织破坏程度的生物指征。
关键词 牙龈炎 慢性牙周炎 抑瘤素M 龈沟液
doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2012.05.082
牙周疾病是由牙周致病原诱发的慢性炎症，其临床结果受到宿主免疫状态的影响。牙菌斑的成分能够诱导炎症细胞，包括淋巴细胞、巨噬细胞和多形核细胞，从而活化局部的宿主反应［1］。牙周炎症的部、往往有炎性细胞聚集，分泌许多细胞因子。这些细胞因子与牙周组织的破坏有关，包括刺激骨吸收和诱导组织降解酶的形成［2］。龈沟液中的细胞因子含量测定常常被用作牙周疾病和评价治疗效果的重要手段。抑瘤素M（OSM）是130gp的细胞因子，它是IL-6细胞因子家族的成员。OSM可以通过调节IL-6自分泌和RANK旁分泌受体活化作用于成骨细胞和破骨细胞，从而调节牙周骨吸收。
目前，没有研究评价过在牙周炎的不同阶段龈沟液中OSM水平，也没有研究评价过牙周炎治疗前后龈沟液中OSM水平的变化。本实验检测了健康牙龈，牙龈炎和慢性牙周炎患者龈沟液中OSM水平，以及慢性牙周炎患者牙周治疗前后龈沟液中OSM的水平的变化。
资料与方法
本组患者60例，女30例，男30例，年龄25～40岁。研究对象符合以条件：①20～40岁；②6个月内没有做过牙周治疗；③口内牙数不少于20颗。排除以下条件：①全身系统性疾病；②妊娠期；③急性进展性牙周炎；④口服抗生素或抗炎药物；⑤吸烟者。
对每个研究对象进行全口牙周检查，根尖片用以评价骨丧失。根据GI、PD和CAL把60例个体分成3组，健康组(group Ⅰ)，牙龈炎组(group Ⅱ)20例，慢性牙周炎组(group Ⅲ)20例，第4组为对慢性牙周炎组进行牙周治疗，6～8周后在同一部位收集龈沟液。
部位选择和龈沟液收集：为了防止牙周探诊出血污染龈沟液，所有的临床检查，部位选择以及研究对象分组由同一个医生完成，然后龈沟液收集在第2天由另外一个医生完成。牙周探诊采用Williams探针。牙龈炎组和慢性牙周炎组，每个研究对象口内龈沟液只选取一个部位采集，健康组则选择多个部位采集龈沟液，以取到足够的量。牙龈炎组选择临床症状最严重的部位；慢性牙周炎组选择牙周指数最高的部位。牙周治疗后选择在同一部位收集龈沟液。
OSM分析：采用ELISA检测龈沟液中的OSM水平。将100μl样本和标准液加入抗人OSM多克隆抗体包被的96孔板(4μg/ml；R&D systems)，室温孵育2小时，加入生物素标记的抗人OSM单克隆抗体(50ng/ml；R&D system)室温孵育1小时，加入200μl底物，室温孵育30分钟，加入50μl反应中止液中止反应。于450nm处检测吸光度，根据标准曲线算出样本中OSM的浓度［3］。
统计学处理：定量数据采用(X±S)进行统计学描述，并应用t检验统计推断，相关分析采用pearson相关(α=0.05)。所有统计分析使用SPSS13.0软件。
结 果
各组间的差异显著(P＜0.05)。各组间OSM水平，见表1。
使用Pearson相关分析牙周指数和龈沟液中OSM水平的关系。在牙龈炎组、慢性牙周炎组、和慢性牙周炎治疗后组，GI、PD、CAL与龈沟液中OSM水平呈正相关，慢性牙周炎治疗后，临床指数的下降也与龈沟液中OSM水平呈正相关。
讨 论
细胞因子在牙周疾病的进展中起到十分重要的作用。OSM是一种独特的多功能细胞因子，在炎性反应，造血，组织重建和发育过程中起重要作用。对于牙周炎，OSM可能通过自分泌或旁分泌方式刺激破骨细胞引起牙槽骨吸收。本研究发现，从健康组、牙龈炎组到牙周炎组，龈沟液中OSM的浓度逐渐增加，说明局部OSM的浓度与疾病的严重程度相关。研究还发现，经过牙周治疗(SRP)后，OSM浓度下降。95%可信度的区分值：龈沟液中OSM的浓度＜0.114pg/μl，可视为健康；0.172pg/μl为牙龈炎患者；持续增加超过0.146pg/μl为慢性泛发性牙周炎。这些研究以OSM作为牙周病的生物学炎性标志，以后还需要大样本的纵向的前瞻性研究证实，从而更深入的了解OSM在牙周病的发病机理中所起的作用。
林等人测量了轻度、中度和重度慢性牙周病患的龈沟液中OSM和IL-6，发现OSM和IL-6的增加与牙周病严重程度成正相关。本研究与以前的发现一致，而且，首次评估了牙龈炎患者龈沟液里OSM的浓度以及牙周炎治疗前后龈沟液里OSM的浓度变化。
牙周疾病和很多全身疾病有很密切的关系。一些研究表明OSM可以通过补充巨噬细胞产生炎性介质帮助形成动脉粥样硬化斑块。并且，文献报道OSM与类风湿关节炎、多发性骨髓瘤、动脉粥样硬化、肥胖症以及Kaposis肉瘤有关［4］。牙周炎病变部例的龈沟液中OSM的水平与全身疾病的关系还没有深入的研究。
本研究表明OSM在牙周炎的进展中起到重要作用。将来需要进行纵向的前瞻性研究以进一步证实我们的结论。龈沟液里OSM的浓度可能是监测牙周疾病进展的有效的生物学指标。
参考文献
1 Zarling JM,Shoyab M,Marquardt H,et al.Oncostatin M:A growth regulator produced by differentiated histiocytic lymphom a cells［J］.Proc Natl Acad Sci USA,1986,83(24):9739-9743.
2 Lin SJ,Chen YL,Kuo MY,Li CL,Lu HK.Measurement of gp130 cytokines OSM and IL-6 in gingival crevicular fluid of patients with chronic periodontitis.Cytokine.2005,30(4):160-167.
3 王平贤,肖亚,张昆甫,等.减少神经钙蛋白阻滞剂对CAN影响的临床研究［J］.医学临床研究,2004,21(7):709-711.4 Wang JM,Deng X,Gong W,et al.Chemokines and their role in tumor growth and metastas is［J］.Immunol Methods,1998,220(12):1-17.